Projet de fin d'étude : Clonage et analyse du gène de la principale lipoprotéine de la membrane externe de Pseudomonas aeruginosa
Etudiant : SALMI MERIEM
Filière : LF SVI - Option Physiologie-Pharmacologie
Encadrant : Pr. BOUIA ABDELHAK
Annèe : 2021
Résumé : Le gène de la lipoprotéine I de la membrane externe de pseudomonas aeruginosa à été isolé et construite dans une banque génomique dont le vecteur phage lamda EBML3, puis sous-cloné dans le vecteur plasmique à faible nombre de copies et à large gamme d'hôtes, pKT240. Le gène cloné à été fortement exprimé, entraînent la production d'une protéine de faible poids moléculaire (8 kD) qui s'est avérée être associée à la membrane externe. L'analyse de la séquence a montré un cadre de lecture ouvert de 83 acides aminés avec un pepetide signal hydrophobe N - terminal putatif de résidus immédiatement suivi par la séquence consensus de lipoprotéine, Gly-Cys-Ser-Ser. La composition prédite en acides aminés du polypeptide mature et celle de la lipoprotéine I purifiée de P. Aeruginosa étaient identiques. Contrairement aux autres lipoproteines de membrane externe Gram-negative. La lipoprotéine I de la membrane externe OprI est un peptidoglycane lié à la protéine de la membrane externe de pseudomonas aeruginosa. Ce est responsable de la résistance intrinsèque de pseudomonas aux antibiotiques.