Etudiant : EL YAMANI JIHANE

Filière : Master Biotechnologie, Ecologie et Valorisation des Phytoressources (BEVP)

Encadrant : Pr. EL MESKAOUI ABDELMALEK

Annèe : 2025

Résumé : La mise en place d'un laboratoire de culture in vitro performant est essentielle au développement des méthodes biotechnologiques de propagation clonale et d'amélioration génétique, notamment pour les espèces à forte valeur socio-économique et écologique. Dans cette étude, après la mise en place d'un laboratoire de culture in vitro dans notre département, nous avons validé son fonctionnement grâce à un protocole d'induction d'embryogenèse somatique pour Pinus pinaster (pin maritime). Ce protocole a été mis en œuvre en cultivant des embryons zygotiques matures sur milieu LM (ATDY10153) supplémenté de concentrations variables de BAP et de 2,4-D. La formation de tissu embryogénique (TE) a été induite avec succès sous des concentrations hormonales faibles à modérées. Le traitement optimal (T0 : 5 µM BAP / 10 µM 2,4-D) a donné un taux d'induction de 5,5 %, légèrement supérieur à T1 (7 µM BAP / 15 µM 2,4-D ; 4,4 %). Ces faibles taux d'induction reflètent probablement la résistance des embryons zygotiques matures. En revanche, la concentration hormonale la plus élevée (T2 : 10 µM de BAP / 20 µM de 2,4-D) a complètement inhibé le développement tissulaire, s’avérant létale. Macroscopiquement, l’ET induite se présentait comme une masse blanchâtre et translucide à la texture granuleuse. L’analyse microscopique a confirmé la réussite de l’induction, révélant de petites cellules isodiamétriques au cytoplasme dense, aux noyaux proéminents et organisées en filaments cellulaires ou en amas denses – signes distinctifs de la compétence embryogénique. Lors de la prolifération sur milieu AUDY10153, T0 a de nouveau surpassé T1, renforçant son aptitude à l’établissement de l’ET. Des embryons zygotiques matures cultivés sur milieu LM ont également généré de l’ET, démontrant la polyvalence du protocole. Ces résultats constituent une base solide pour la biotechnologie du pin maritime, ouvrant la voie à de futures avancées en génie génétique, en manipulation génomique et en propagation de génotypes clonaux sélectionnés.