Etudiant : OUHMMOU MOHAMED

Filière : Master d'excellence: Biotechnologie Alimentaire et Management de la Qualité (BAEMQ)

Encadrant : Pr. TILAOUI MOUNIR

Annèe : 2026

Résumé : La fiabilité des résultats d’analyses microbiologiques constitue une exigence fondamentale pour la sécurité sanitaire des aliments. Un faux négatif peut conduire à la mise sur le marché d’un produit contaminé, tandis qu’un faux positif entraîne des pertes économiques liées au retrait de produits conformes. Dans ce contexte, l’accréditation des laboratoires selon la norme NM ISO/IEC 17025 exige la validation ou la vérification des méthodes d’essai afin de démontrer leur aptitude à l’emploi. Le présent travail, réalisé au sein du Laboratoire Régional d’Analyses et de Recherches de Laâyoune (LRARL – ONSSA), porte sur la vérification des méthodes de dénombrement des coliformes et d’Escherichia coli conformément aux exigences de la norme ISO 16140. L’objectif est d’évaluer les performances de ces méthodes et de confirmer leur aptitude à produire des résultats fiables dans les conditions de fonctionnement du laboratoire. La démarche expérimentale repose sur l’estimation du biais (eBiais), défini comme la différence absolue entre les résultats obtenus sur une matrice artificiellement contaminée et ceux de la suspension d’inoculum correspondante. La souche de référence Escherichia coli ATCC 25922 (WDCM 00013) a été utilisée pour contaminer quatre matrices alimentaires — lait pasteurisé, farine de poisson, pâte à pizza et viande hachée — à trois niveaux de contamination. Le dénombrement a été réalisé sur gélose TBX à 44 °C pour E. coli (NM ISO 16649-2) et sur gélose VRBL à 30 °C pour les coliformes (NM 08.0.142). La fidélité de la méthode a été appréciée à travers la répétabilité et la reproductibilité intra-laboratoire. Les résultats montrent que, pour l’ensemble des matrices et à chaque niveau de contamination, le biais estimé demeure inférieur au seuil d’acceptation de 0,5 unité log₁₀ fixé par la norme. Les critères de fidélité sont également respectés. Les méthodes NM ISO 16649-2 et NM 08.0.142 sont donc déclarées vérifiées et aptes à atteindre la performance requise. Ce travail contribue au renforcement du système de management de la qualité du laboratoire et au maintien de son accréditation selon la norme NM ISO/IEC 17025.